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凯氏定氮仪是如何确定蛋白质中氮的总量的

更新时间:2020-01-02 11:09

    氮是蛋白质等有机材料中发现的五种主要元素之一,这一事实得到了化学家的认可,他用它来确定从各种生物中取出的样品中的蛋白质含量。凯氏定氮仪用于确定含有铵盐,硝酸盐或有机氮化合物的物质混合物中的氮含量。该方法中使用的中心基础是使用强硫酸氧化有机化合物。当有机材料被氧化时,它所含的碳被转化为二氧化碳,氢被转化为水。来自多肽链的肽键中发现的胺基的氮被转化为铵离子,铵离子溶解在氧化溶液中,随后可转化为氨气。
    凯氏定氮仪是计算各种材料中蛋白质含量的全球标准,包括人类和动物食品,肥料,废水和化石燃料。凯氏定氮方法包括三个步骤,必须按顺序仔细执行,样品首先在强硫酸中在催化剂存在下消化,这有助于胺氮转化为铵离子,然后将铵离子转化为氨气,加热并蒸馏。将氨气引入捕集溶液中,使其溶解并再次成为铵离子,最后通过用标准溶液滴定来确定捕获的氨的量,并进行计算。
    第一步、消化
    这是分析中最耗时的步骤,该步骤的目的是分解将多肽保持在一起的键,并将它们转化为更简单的化学物质,例如水,二氧化碳,当然还有氨。通过催化剂和中性物质如硫酸钾的存在可以显着加速这种反应,这提高了消化酸的沸点,从而提高了反应温度。催化剂也用于帮助消化过程,已尝试过许多不同的方法,包括硒,汞,铜或汞或铜离子。通过以下方式完成消化:
    第二步、蒸馏
    蒸馏的下一步骤的目的是将氨与消化混合物分离。这是通过,使用氢氧化钠升高混合物的pH。这具有将铵离子改变为气体氨的效果。通过蒸馏氨将氮气从消化混合物中分离出来,然后将蒸馏的蒸汽捕集在70℃的约15mlHCl(盐酸)的特殊捕集溶液中。毫升水。取出捕集瓶并用水冲洗冷凝器,以确保所有的氨都已溶解。
    第三步、滴定
    当氨溶解在酸捕集溶液中时,它会中和它在那里找到的一些HCl。然后可以回滴定剩余的酸,用标准的已知碱溶液滴定。以这种方式,可以计算从消化溶液中蒸馏出的氨的量,因此确定蛋白质中的氮的量。

文章来源:上海靳澜仪器制造有限公司
 

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